酶标板(ELISAPLATE):
在酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。此外,作为载体的固相聚苯乙烯(Polystyrene)表面对抗原、抗体或抗原抗体复合物的吸附也起着重要作用。
抗原、抗体和其它生物分子通过多种机制吸附至载体表面,这包括通过疏水键、流水/离子键的被动吸附,通过引入其它活性基团如氨基和碳基的共价结合,以及通过表面改性后的亲水键结合。
为适应用户在建立酶联免疫吸附试验方法和试剂盒生产时的各种可能的需要,加拿大生化制品图际公司开发生产了符合z新国际标准的对蛋白和其它生物分子具不同结合能力的酶标板,用户可根据抗原、抗体的性质和特点进行优化选择。去污剂Tween 20等与蛋白如BSA、脱脂牛奶、血清联用。
高结合力酶标板(High Binding ELISA Plate): 酶标板经表面处理后蛋白结合能力大大增强,可达到400-500ng IgG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD.使用该类酶标板可提供敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易产生非特异性反应.抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合的部位,需使用蛋白作为封闭剂. 中结合力酶标板(Medium Binding ELISA Plate): 酶标板经表面琉水键被动与蛋白结合,适合作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200-300ng IgG/cm2.由于该类酶标板所具的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可降低潜在的非特异性交叉反应.该类板可以惰性蛋白或非离子去污剂作为封闭液.
氨基化酶标板(Aminated ELISA Plate): 酶标板经表面改性处理后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由亲水键取代.该类酶标板适合作为小分子蛋白的固相载体.使用合适的缓冲液和pH值,其表面可通过离子键与带负电荷的小分子结合.由于其表面的亲水特性和可通过其它交联剂共价结合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污剂的蛋白分子.该类板的缺陷为由于降低了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其表面需有效的封闭.由于亲水和共价的表面特性,使用封闭液必须能够与非反应性氨基集团和所选择的交联剂中任何官能基团如succinimide、aldehyde和maleimide发生作用。
下表列出加拿大公司三类酶标板的作用原理、特性和适用举例。 |